大家都知道,培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型,對營養物質的要求也各不相同,加之實驗和研究的目的不同,所以 培養基的種類很多,使用的原料也各有差異。為了達到實驗和研究的目的,要按照培養基的配方進行配制。而任何一種培養基一經制成就應及時徹底滅菌,以備純培 養用。一般培養基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。那么培養基配好后為什么必須立即滅菌?
發酵過程中,培養基滅菌主要有以下幾個原因:如不滅菌,會使生物反應的基質或產物,因雜菌的消耗而損失,造成生產能力的下降;雜菌也會產生代謝產物,這 就使產物的提取更加困難,造成得率降低,產品質量下降;雜菌大量繁殖后,會改變反應液的pH值,使反應異常;有些雜菌會分解產物,使生產失敗;如果發生噬 菌體污染,生產菌細胞將被裂解,使生產失敗。
培養基滅菌是殺滅培養基中本身的原著菌或在空氣中附著的雜菌,更好的讓目標菌生長(減少雜菌消耗培養基中的營養,而且有些雜菌會抑制你目標菌的生長)。
一般人工培養菌基本上是盡可能讓其生長快速或者產生代謝產物,因此就讓其在最適培養基上生長,以減少培養時間與提高經濟效益。
培養基的滅菌效果檢查方法
將培養基放在將要做實驗的溫箱中進行培養(時間與培養實驗一致,一般是24小時)看滅菌后培養基的菌落就可以判斷。有時也為了使用培養更加科學,在做細菌培養時,除在在涂上需要培養的菌種外,同時另外加一個培養基(空白)同時進行同條件培養進行對比。
培養基配置好后如果存放時間較長而不進行滅菌操作,那么培養基內的微生物就會在其中發酵生長從而破壞培養基內的營養成分,并且這些微生物的生長過程中會分泌一些毒素從而會抑制目標培養菌的生長。
另外,可以滅菌結束后將培養基放置在培養箱內2~3天,如觀察培養基無任何變化(無菌落生長)即說明已達到無菌狀態。
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